بررسی امکان وجود مقاومت سوسک برگ خوار سیب زمینی leptinotarsa decemlineata (say)به ترکیب فسفره فوزالن در استان همدان

حساسیت به فوزالون و ویژگی های کینتیکی استیل کولین استراز چهار جمعیت مزرعه ای ده پیاز، علی آباد، ینگیجه و بهار، جمع آوری شده از مزارع صنعتی تولید سیب زمینی استان همدان، در مقایسه با یک سویه حساس مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل از آزمون های زیست سنجی به روش موضعی بر روی لاروهایِ سن چهارم، وجود مقاومت حداقل 5/154و حداکثر 1/252 برابری را در جمعیت مزرعه ای تأیید نمود. بررسی های سینرژیسمی نشان داد که علی رغم وجود مسیرهای استرازی و گلوتاتیون اس-ترانسفرازی فعال بر ضد فوزالون، چنین مسیر هایی نمی توانند نقش موثر و قابل توجهی در مقاومت جمعیت های مقاوم به فوزالون ایفا کنند. در مورد سوسک کلرادو ایزومرهایی از سیستم آنزیمی سیتوکروم پی-450، که در فعال سازی حشره کشهای فسفره در درون بدن نقش دارند، در مقایسه با ایزومرهای شرکت کننده در فرایند غیرسمی سازی آنها، به مراتب نسبت به pbo حساستر بوده اند و به همین دلیل pbo در دوز مورد استفاده در این بررسی، علیرغم انتظار اولیه باعث کاهش سمیت فوزالون و در نتیجه کاهش تلفات لاروها گردید. درعین حال ممکن است تأثیر pbo بر روی سمیت فوزالون وابسته به دوز مصرفی باشد، به گونه ای که در غلظت های بالاتر و یا کمتر از مقدار استفاده شده در این تحقیق، باعث تشدید و یا تضعیف سمیت فوزالون گردد. pbo در سویه حساس به طور معنی داری سبب کاهش سمیت فوزالون در دوز مصرفی گردید. برای جمعیت های مزرعه ای نیز نتایج مشابهی بدست آمد. کارایی هیدرولیزی زیرنهشت ها برای جمعیت های مقاوم و حساس متفاوت بود. ترتیب کارایی هیدرولیزی زیرنهشت هــا برای جمعیت هــای مزرعه ای و نیز سویه حساس عبارت بود از : btc < ptc < atc. نرخ هیدرولیز زیرنهشت های atc و ptc برای سویه حساس در مقایسه با هر یک از جمعیت های مزرعه ای، بیشتر برآورد گردید، در حالی که نرخ هیدرولیز زیرنهشتی btc، برای سویه حساس به مراتب کمتر از vmax تعیین شده برای جمعیت های مزرعه ای بود. مقدار km برای زیرنهشت atc در سویه حساس، کمترین مقدار بود، بنابراین شکل حساس آنزیمی، به استیل تیوکولین آیداید بیشترین گرایش را داشته است. آنزیم استیل کولین استراز جمعیت ده پیاز سوسک کلرادو، در مقایسه با آنزیم سویه حساس برای زیرنهشت های استیل تیوکولین آیداید و پروپیونیل تیوکولین آیداید، به ترتیب 8/1 و 7/1 برابر گرایــش کمتری ( مقادیر km بالاتر) نشان داد. در مقایسه با سویه حساس، مقدار vmax برای زیرنهشت های atc و ptc در جمعیت ده پیاز، به ترتیب 88/1و 92/1 برابرکمتر وبرای btc 4/1 برابر بیشتر بود. در خصوص فعالیت کاتالیتیکی آنزیم استیل کولین استراز نسبت به زیرنهشتی btc، شرایط مشابهی برای جمعیت های مزرعه ای و سویه حساس مشاهده شد، جمعیت بهار با فعالیت کاتالیتیکی معادل protein mu/ mg 7/4 بیشترین و سویه حساس با فعالیت کاتالیتیکی معادل protein mu/ mg 3/2، کمترین مقدار vmax را به خود اختصاص دادند. براساس نرخ ثابت بیومولکولار (ki)، ترتیب قرارگیری بازدارنده ها از قوی ترین به ضعیف ترین برای هر چهارجمعیت مزرعه ای عبارت بود از: متیل پارااکسان < دیازاکسان < اتیل پاراکسان. در حالیکه این ترتیب برای سویه حساس عبارت از : دیازاکسان < اتیل پارااکسان < متیل پاراکسان. استیل کولین استراز هر چهار جمعیت مزرعه ای در مقایسه با سویه حساس به متیل پاراکسان حساسیت کمتری داشت. استیل کولین استراز جمعیت علی آباد کمترین حساسیت و استیل کولین استراز جمعیت مزرعه ای بهار بیشترین حساسیت ( شبیه ترین به سویه حساس)، را نسبت به متیل پاراکسان نشان دادند. صرف نظر از موارد مربوط به حذف ها و جایگزینی ها، مقایسه توالی دی.ان.آی ژنومی سویه حساس و جمعیت های مزرعه ای نشان داد که آنها از نظر موقعیت 59 نوکلئوتید با هم تفاوت دارند، اما تنها 20 مورد از این تفاوتها به جایگزینی آمینواسیدی (جهش های v44g، e128d، r140g، i143f، t248s، f250s، g251c، i261m، s265i، s291g، g353r، l356r، e366k، s378e ،s378r و e382d) منجر شده است. از بین موارد ذکر شده، فقط جهش s291g، قبلا در سویه مقاوم به آزینفوس متیل سوسک کلرادو مشاهده شده و گزارش سایر موارد جایگزینی ها برای اولین بار بوده است.